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高效液相色谱法,分离是通过分析物之间的分配在一列挤满了固定相和液体流动相泵通过列。传统的固定相极性,如二氧化硅,以及所使用的流动相为相对非极性。这被称为正相HPLC模式。今天虽然反相HPLC较为常见,占超过75%正在做的分离。反相高效液相色谱法,列挤满了疏水性粒子,例如一架C-18键合相。流动相为水(或酸或碱,或缓冲区修改的水)和甲醇和乙腈等有机溶剂混溶任何组合。高效液相色谱法的其他方式包括:

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高效液相色谱、 分离被透过的包装在一个列固定相和液相移动泵出列之间进行分配。

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在HPLC分离,是通过分配之间的可测定多种分析物的静止阶段包装在一个列和液体流动阶段,被抽上来,通过该列。 一直以来,人们在静止期是极,如硅、和使用的移动阶段相对而言非极性。 这种模式也被称为HPLC正常阶段。 虽然今天,相反是HPLC阶段更为常见,占75%的离职。
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